1. 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA
如果DNA出現(xiàn)降解或者是混有其他雜質,例如蛋白質、RNA的話,那么瓊脂糖凝膠就能夠檢測得到DNA的質量。 標準主要是通過觀察電泳條帶的亮度,通過亮度就可以粗略地計算出DNA條帶的含量。如果DNA出現(xiàn)損失,對應的條帶就會變暗或者是消失。 線性的單一DNA樣品一般是單條帶,質粒的話可能會有2-3條帶. 如果條帶變寬、變暗、或者變成彌散的DNA條帶,表示DNA非特異的降解. 如果條帶變成多條,表示可能被酶切.如果質粒被單酶切,可能變成一條亮帶. 如果有蛋白質污染,上樣孔可能發(fā)亮.如果有RNA污染,可能小分子量部分會有彌散.
2. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna實驗報告
可以,瓊脂糖凝膠電泳可以通過限制性酶切多態(tài)性(RFLP)或者擴增片斷多態(tài)性(AFLP)來鑒定檢測的DNA。
就是不同DNA被特定的限制性內切酶切出來的片斷大小是不一樣的,在瓊脂糖凝膠電泳跑出來的條帶也不一樣,如果是相同的DNA,結果就一樣。3. 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA心得體會
1.凝膠濃度高了容易起泡,尤其是劣質瓊脂糖(濃度1-2%就可以)
2.如果要用高濃度的話,可以試試趁膠還熱的時候,用小藥勺之類的東西把起泡趕到邊緣后挑起
3.剛加熱完是有小氣泡的,稍微靜置一下,等氣泡都消了,再倒進電泳槽
4.如果靜置到有點凝固了還是有氣泡的話,說明你加熱的時間不夠,沒有完全融化
4. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna注意事項
DNA如果降解或者混有其他雜質比如蛋白質、RNA的話,在電泳中可以檢測的到.線性的單一DNA樣品一般是單條帶,質粒的話可能會有2-3條帶.如果條帶變寬、變暗、或者變成彌散的DNA條帶,表示DNA非特異的降解.‘如果條帶變成多條,表示可能被酶切.如果質粒被單酶切,可能變成一條亮帶.如果有蛋白質污染,上樣孔可能發(fā)亮.如果有RNA污染,可能小分子量部分會有彌散.等等.標準是電泳條帶亮度.通過亮度可以粗略計算DNA條帶的含量.如果DNA有損失,對應的條帶會變暗或者消失
5. 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗報告注意事項
DNA分子在瓊脂糖凝膠中脈沖時有電荷效應和分子篩效應。DNA分子在高于等電點的ph溶液中帶負電荷,在電場中向正極移動。由于糖-磷酸骨架在結構上的重復性質,相同數量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。
6. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna實驗結果圖
RNA分子有很多二級結構,需經變性劑處理,而DNA一般不需要變性處理 RNA電泳的電泳槽及緩沖液均需要確保無RNAase,有RNAase抑制劑處理過;而DNA相應的則需要DNAase抑制劑處理 所用的緩沖液不同 染色過程不同
7. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna實驗原理
二、實驗原理
瓊脂糖凝膠電泳是用于分離、鑒定和提純DNA片段的標準方法。瓊脂糖是從瓊脂中提取的一種多糖,具親水性,但不帶電荷,是一種很好的電泳支持物。DNA在堿性條件下(pH8.0的緩沖液)帶負電荷,在電場中通過凝膠介質向正極移動,不同DNA分子片段由于分子和構型不同,在電場中的泳動速率液不同。溴化乙錠(EB)可嵌入DNA分子堿基對間形成熒光絡合物,經紫外線照射后,可分出不同的區(qū)帶,達到分離、鑒定分子量,篩選重組子的目的
8. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna失敗的原因
補充一點就是看看你的片段是否有這個酶的酶切位點。
盡管有些好笑,但是有人確實犯過這樣的錯誤。
你提取的質粒濃度很低的話,在酶切的時候就少加點水多加點質粒。
不然濃度低當然看不見。
9. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna時點樣孔放哪
DNA分子在高于其等電點的pH溶液中中帶負電,因為所說的等電點是指蛋白質或兩性電解質所帶凈電荷為零時溶液的pH,此時蛋白質或兩性電解質在電場中的遷移率為零.當外界溶液的pH大于兩性離子的等電點值,兩性離子釋放質子帶負電;當外界溶液的pH小于兩性離子的等電點值,兩性離子質子化帶正電.