實驗室用小型發(fā)酵罐，發(fā)酵現(xiàn)象演示實驗需要什么儀器與材料

雖然我很聰明，但這么說真的難到我了

發(fā)酵罐啊。。。這是必須的。實驗室可以用專門的小罐。原料方面就看你要什么產(chǎn)物了。如果周期短一點，就去制谷氨酸什么的，三十個小時左右的樣子吧。如果周期不介意長一點就可以制酒啦。僅僅是發(fā)酵過程的話原料不需要像工業(yè)生產(chǎn)那樣從頭開始，完全可以用中間物開始。省掉一些步驟。

發(fā)酵罐擴大培養(yǎng)原理是進行液體發(fā)酵。生產(chǎn)上使用的發(fā)酵罐容積大，均用鋼板或不銹鋼板制成。供實驗室使用的小型發(fā)酵罐，其容積可從約1升至數(shù)百升或大些。10升以下是用耐壓玻璃制作罐體，10升以上用不銹鋼板或鋼板制作罐體。發(fā)酵罐配備有控制器和各種電極，能自動地調(diào)控試驗所需要的培養(yǎng)條件，是微生物學(xué)、發(fā)酵工程、醫(yī)藥工業(yè)等科學(xué)研究所必需的設(shè)備。

這個要考慮到你的需求和你的預(yù)算，不知道你所需要的是多大體積的罐子，實驗室如果小試的話，也存在從5L到50L的大小，所以最好還是確定型號。如果是在學(xué)校實驗室或者研究所的話，可以考慮用進口的一些發(fā)酵罐，比如美國NBS的罐子，無論從性能和穩(wěn)定性來說，基本上都是不錯的選擇，缺點就是價格偏高，10L的罐子，差不多價格在20w以上。如果是工廠在做一些小試的話，可以考慮用國產(chǎn)的，無論是玻璃罐子或者不銹鋼罐子，價格都不會很高，價格在10w以內(nèi)。

不好意思，我不是搞發(fā)酵的，只是實驗室有人研究發(fā)酵才略懂一二的，我們實驗室是用小發(fā)酵罐（1L好像是）模擬培養(yǎng)，是要富集發(fā)酵產(chǎn)物的，可以隨時調(diào)節(jié)pH。要是用搖床應(yīng)該是不流動的，就是營養(yǎng)不會得到補充，我個人認為最好還是用生產(chǎn)類似的發(fā)酵罐進行培養(yǎng)比較靠近生產(chǎn)的數(shù)值。

搖床培養(yǎng)是要加入空氣吧，乳酸菌據(jù)我所知應(yīng)該是兼性厭氧的比較多，所以有空氣的話應(yīng)該不會影響生長，好像還會長的更好，如果你想得到的產(chǎn)物是菌體的話就還好，要是想要得到發(fā)酵副產(chǎn)物的話就應(yīng)該采取厭氧，可以充氮氣搖床培養(yǎng)。

總過濾器滅菌時，一定要保證蒸汽的壓力，使用壓力一定要在0.3~0.4 MPa之間，滅菌過程中過濾器的表壓應(yīng)在0.15~0.20 MPa左右。中小型過濾器一般保壓45~60 min，總過濾器（一級過濾器）保壓時間為1.5~2 h。對于新裝介質(zhì)的過濾器，滅菌時間應(yīng)適當延長一些，一般延長15~20 min。滅菌后要用壓縮空氣將介質(zhì)吹干，吹干時間可根據(jù)介質(zhì)的吸水性質(zhì)和過濾器的規(guī)模而定。玻璃纖維吹干時間略短，棉花介質(zhì)稍長，中小型過濾器吹干時間在1~2 h，大型過濾器可達2~4 h。用壓縮空氣吹時，氣流要適當，太小吹不干，過大容易將介質(zhì)頂翻，造成空氣走短路而帶菌。

我們公司專門做試驗用的小型發(fā)酵裝置。上月曾給北京中關(guān)村二村科學(xué)工程研究所做了一套小型的試驗裝置。大體思路就是使發(fā)酵料在一個人為設(shè)定的環(huán)境中進行發(fā)酵。本裝置要求不銹鋼材質(zhì)，最好達到自動化控制這樣對溫度和濕度的控制更為精確。另外發(fā)酵不可能是單一一種物質(zhì)發(fā)酵，所以發(fā)酵罐入口擁有類似于絞龍的裝置把發(fā)酵料攪拌均勻。加熱可以采取小型電加熱帶，纏在發(fā)酵罐外部用晶閘管進行溫控。補水就很容易解決了你不妨多想想。

你好！hehe`~超市買酵母粉，然后你用水和點面。放在溫度較高的地方，冬天的話比如暖氣這些半天就可以了。這個就是最簡單的發(fā)酵試驗了。北方人的蒸饅頭，對于面都要發(fā)酵一下的。如有疑問，請追問。

你的發(fā)酵罐是用什么樣的滅菌方法？蒸汽原位滅菌（有蒸汽發(fā)生器）？不是的話，直接把罐放到滅菌鍋里去滅！下面是蒸汽原位滅菌的流程： 滅菌要進行空消和實消兩步?？障窃谕读锨?，對氣路、料路、種子罐、發(fā)酵罐用蒸汽進行滅菌，消除所有死角的雜菌，保證系統(tǒng)處于無菌狀態(tài)。實消是當罐內(nèi)加入培養(yǎng)基后，用蒸汽對培養(yǎng)基進行滅菌的過程，種子罐和發(fā)酵罐實消的操作過程相同。 空消過程中，維持蒸汽溫度121℃左右，先開排污水閥和進氣閥，排空夾套水，在對管路、濾器和種子罐發(fā)酵罐滅菌，空消時間大約為30到40分鐘，當設(shè)備初次使用或者長期不用的情況下，最好采用間歇滅菌的方法，間歇滅菌指第一次空消結(jié)束后，間隔3到5個小時再空消一次，以便殺死芽孢。除菌過濾器的濾芯不能承受高溫高壓，因此，蒸汽減壓閥必須調(diào)整在0.13Mpa，不得超過0.15MPa?？障麜r，應(yīng)將罐上的接種口、排氣閥及料路閥門微微打開，使蒸汽通過這些閥門排出，同時保持罐壓為0.13～0.15Mpa?？障Y(jié)束后，應(yīng)將罐內(nèi)冷凝水排掉，并將排空閥門打開，防止冷卻后罐內(nèi)產(chǎn)生負壓、損壞設(shè)備。空消時，溶氧、PH 電極取出，可以延長其使用壽命。 空消結(jié)束后，應(yīng)盡快將配好的培養(yǎng)基從加料口加入罐內(nèi)，此時夾套內(nèi)應(yīng)無冷卻水。培養(yǎng)基在進罐之前，應(yīng)先糊化，一般培養(yǎng)基的配方量以罐體全容積的70%左右計算(泡沫多的培養(yǎng)基為65% 左右，泡沫少的培養(yǎng)基可達75%～80%)，考慮到冷凝水和接種量因素，加水量為罐體全容積的50% 左右，加水量的多少與培養(yǎng)基溫度和蒸汽壓力等因素有關(guān)，需在實踐中摸索。先開啟機械攪拌裝置，使罐內(nèi)物料均勻混合，轉(zhuǎn)速50～100rpm。打開夾套蒸汽閥、排汽閥，對罐內(nèi)培養(yǎng)基預(yù)熱，當罐內(nèi)溫度升到90℃時，關(guān)閉夾套進汽閥，打開罐內(nèi)所有進汽閥，通入蒸汽。當罐溫上升到105℃時，緩緩打開排汽閥，將罐頂冷空氣排掉，持續(xù)五分鐘后，關(guān)閉排汽閥。當罐壓升至0.12Mpa，溫度升到121～123℃時，控制蒸汽閥門開度，保持罐壓不變，30 分鐘后停止供汽。打開冷卻水的進排閥門，在夾套內(nèi)通水冷卻，當罐內(nèi)壓力降至0.05Mpa 時，微微開啟排氣閥和進氣閥，進行通氣攪拌，加速冷卻速度，并保持罐壓為0.05Mpa，直到罐溫降至接種溫度。

應(yīng)該是發(fā)酵條件的控制問題。一般認為，發(fā)酵罐越小，條件變化越劇烈，也越不容易控制。比如溫度、ph值、溶氧等，本身東西少，參數(shù)變化就快，就相當于微生物的生長環(huán)境總是處于變化之中，當然就不利于發(fā)酵的進行了。罐體越大，條件變化就越緩慢，控制起來也越容易。至少，像保持恒定的溫度和通風(fēng)量，就比小罐容易得多。對于微生物來說，生存環(huán)境是穩(wěn)定的，也有利于發(fā)酵的進行。

　　1.材料與方法：　　1.1材料：　　1，菌種：大腸桿菌　　2，培養(yǎng)基：?種子培養(yǎng)基（葡萄糖5.0g，蛋白胨5.0g，酵母膏2.5g，牛肉膏5.0，水500ml，pH值7.0），　　?發(fā)酵培養(yǎng)基（葡萄糖100g，蛋白胨50g，酵母膏25g，牛肉膏50g，氯化鈉25g，氯化銨25g，水5L，pH7.0，　　3，試劑：泡敵，菲林試劑，0.1%的標準葡萄糖溶液，40%氫氧化鈉?！　?，儀器設(shè)備：BIOTECH-7BGZ發(fā)酵罐一套，分光光度計，旋轉(zhuǎn)式搖床，離心機，烘箱等?！　?.2實驗原理：　　發(fā)酵罐是進行液體發(fā)酵的專用設(shè)備。實驗室使用的小型發(fā)酵罐，其體積可從1L至數(shù)百升。一般5L一下是用耐壓玻璃制作罐體。發(fā)酵罐配備控制系統(tǒng)，它主要是對發(fā)酵過程中的各種參數(shù)如溫度，PH，溶解氧，攪拌速度，空氣流量，補料，泡沫水平等進行設(shè)定，顯示，記錄以及對這些參數(shù)進行反饋調(diào)節(jié)控制?！　〈竽c桿菌是遺傳工程過程中常用的受體菌。通過控制臺合適的培養(yǎng)條件，可使大腸桿菌迅速持續(xù)地生長，獲得所要求的高產(chǎn)培養(yǎng)物?！　榱肆私獍l(fā)酵過程中菌體的生長及對培養(yǎng)基的利用情況，需要發(fā)酵過程中定時設(shè)定地取樣測定。包括對細菌進行鏡檢，測定不同時期發(fā)酵液的細菌濁度及殘留還原糖的變化?！　?.3實驗流程：　　培養(yǎng)24h 培養(yǎng)12h　　菌種 斜面? 一級接種 二級接種　　37℃ 37℃ （500ml搖瓶）　　培養(yǎng)基　　8~10h　　發(fā)酵罐 管路準備 實罐滅菌 發(fā)酵 放罐　　37℃　　取樣 分析測定　　1.4發(fā)酵罐剖面圖：　　1.5實驗具體步驟：　　1.5.1菌種準備　　1,配制培養(yǎng)基　　配制種子固體培養(yǎng)基100mL,分裝試管,0.1MPa滅菌20min,然后擺成斜面.　　配制種子培養(yǎng)液600mL,分裝50mL于一個250mL三角瓶中(作一級種子瓶),余下550mL平均分裝于三個500mL三角瓶中(作二級種子用),同上滅菌.　　2,接種與培養(yǎng)　　上罐前兩天,從冰箱中取出菌種轉(zhuǎn)接斜面,37℃培養(yǎng)24h.　　上罐前一天,由斜面菌種轉(zhuǎn)接一級種子瓶, 37℃振蕩培養(yǎng)12h,然后轉(zhuǎn)接二級　　種子瓶, 37℃振蕩培養(yǎng)10h.　　1.5.2上罐前的準備及實罐滅菌　　1，洗凈發(fā)酵罐及各聯(lián)接膠管　　配制發(fā)酵培養(yǎng)基5.0L,置發(fā)酵罐內(nèi),加入幾滴泡敵.　　校正pH電極和溶氧(DO)電極.　　把電極插口,取樣管,補料口,消泡劑料瓶等固定,密封好后,開夾套出,進水閥V2,W1,使夾套充滿水,用保護罩蓋住罐蓋及發(fā)酵罐,用傾倒螺釘鎖緊法蘭,開保護罩頂部排氣閥V4,啟動蒸氣發(fā)生器,啟動攪拌馬達,調(diào)轉(zhuǎn)速300r/min,開啟冷凝水出水閥V1,開啟蒸氣閥門S1,進行在位滅菌；　　2，當保護罩頂部閥門V4有蒸氣排出時,2min后關(guān)閉閥門,當罐溫接近滅菌溫度時,微開閥V4適當排氣,并調(diào)整蒸氣閥S1維持罐溫.保溫結(jié)束后,關(guān)蒸氣閥S1,全開冷凝水出水閥V1,開進水閥W3,將溫度設(shè)定在37℃,切入自動.當溫度降到100℃以下,緩緩開排氣閥V4,使保護罩頂壓力表指示為零,移去保護罩；　　3，連接通氣管路,將進氣過濾器K7口與控制臺左側(cè)空氣出口連通,開彈簧夾,接通空氣壓縮機電源 , 對 發(fā) 酵 罐 進 行 通 氣 , 調(diào) 整 空 氣 流 量 3 ～5L/min.當溫度達到37℃時,將預(yù)先滅菌的pH電極,DO電極(75%酒精消毒,UV消毒)接入發(fā)酵罐,連接各電極導(dǎo)線；　　4，將流加堿的管線與泵和罐體連接,通過面板操作開關(guān)選擇堿泵,打開手動開關(guān),使膠管內(nèi)充滿液體,將輸出上限設(shè)在15%,下限設(shè)為"0",待一切準備就緒,將"手動"開關(guān)調(diào)節(jié)到"自動"狀態(tài).設(shè)定攪拌轉(zhuǎn)速為300r/min,空氣流量2～3L/min, pH7.0, DO100%,系統(tǒng)進入發(fā)酵狀態(tài).　　1.5.3發(fā)酵操作　　當發(fā)酵罐內(nèi)溫度達到并維持在所需溫度后,進行如下操作:　　取樣:松開彈簧夾J2,用無菌空氣將取樣管殘液壓入發(fā)酵罐內(nèi),再夾緊J2,將出料管放入接料瓶,松開取樣管彈簧夾J3,發(fā)酵液被壓入接料瓶,開J2,J3排出取樣管內(nèi)殘料,夾緊J2,J3.　　接種:將酒精棉置于接種口槽中,旋松接種口,點燃酒精棉,在火焰保護下,打開接種口,倒入二級種子,然后旋緊接種蓋,移去火焰圈.接種后立即進行第一次取樣,用于測定細菌OD值.　　1.5.4發(fā)酵過程中的管理　　每小時記錄發(fā)酵過程溫度,pH,DO,通風(fēng),轉(zhuǎn)速的測定數(shù)值,并記錄操作情況.注意發(fā)酵罐運轉(zhuǎn)是否正常,檢查各控制參數(shù)是否在合適的范圍內(nèi),遇有故障及時排除.每小時取一次樣.每次取樣50mL.取樣時,用量筒準確取流出的培養(yǎng)液50mL, 對號倒入三角瓶中,封口,立即放入二樓冷庫中保存.　　1.5.5發(fā)酵過程中各理化指標的測定　　取樣：樣品→振蕩均勻→取樣5mL→測OD值　　↓　　離心(3000rpm,10min)　　↓　　上清液　　吸光度:將分光光度計開機,選用A600波長,預(yù)熱20min,用蒸餾水調(diào)節(jié)零點,將對照樣倒入比色杯中,作為空白對照,并對不同樣液依次進行測定,對濃度大的菌懸液用對照樣(未接種的培養(yǎng)基)適當稀釋后測定,使其OD值在0.1～1.0之間,經(jīng)稀釋后測定的OD值要乘以稀釋倍數(shù),才是培養(yǎng)液實際的OD值.　　1.5.6放罐　　經(jīng)過發(fā)酵約10h后,菌量增長(OD)值緩慢時,便可放罐.排放液需經(jīng)滅菌處理才可進入下水道.　　1.5.7清洗　　放罐后,將發(fā)酵罐清洗干凈,關(guān)閉所有電源.